制備液相色譜技術基于樣品在固定相和流動相之間的分配差異進行分離。當樣品進入色譜柱后，由于不同組分在固定相和流動相中的溶解度、吸附力等特性不同，它們會以不同的速度在色譜柱中移動，從而實現分離，主要由輸液系統、進樣系統、色譜柱、檢測系統和餾分收集器等組成。
根據固定相顆粒度和柱子的尺寸，采用不同的裝柱方法，往往裝填越好分離效果越好。濕法裝柱是其中一種常用的裝柱方法，它可以迫使相對稀松的固定相懸漿以高速裝入色譜柱子，從而減少空隙的形成，通常配備餾分收集器，用于自動收集分離后的餾分。這有助于提高收集效率和純度，并減少人工操作誤差。
制備液相色譜技術以其靈活多樣、應用廣泛和可規(guī)模化生產的特點，在化學、制藥、生物技術等領域發(fā)揮著重要作用。通過掌握其基本原理、選擇合適的部件、優(yōu)化裝柱方法和流動相選擇以及有效使用餾分收集器，可以實現對目標物質的高效純化。
1.高效分離：利用色譜柱的分離能力，能夠有效地去除雜質，得到高純度的目標物質。
2.靈活多樣：可以靈活地對待復雜樣品，如大分子、高極性物質、天然產物、金屬離子等不同類別樣品進行純化，具有高度可控性和復雜性分離性。
3.應用廣泛：不僅適用于化學分析領域，還廣泛應用于生物醫(yī)藥、環(huán)境監(jiān)測、食品安全等領域。
4.可規(guī)模化生產：可以根據需要選擇不同規(guī)格的色譜柱和設備，實現從實驗室小樣到工業(yè)化生產的規(guī)模化純化。
制備液相色譜儀的測定步驟：
-根據樣品性質和分析目的選擇合適的填料(如正相或反相填料)和色譜柱。
-準備合適的流動相，通常是溶劑或溶液的混合物，并根據需要過濾、除氣。
-對樣品進行預處理，如過濾、離心等，以去除懸浮物和大分子物質。
-將選定的填料裝入色譜柱中，并確保柱填充均勻。
-用流動相沖洗色譜柱，直至柱內無氣泡且達到平衡狀態(tài)。
-將經過預處理的樣品通過進樣器注入色譜柱中。
-根據化合物在固定相和流動相之間的相互作用力差異，實現化合物的分離。
-利用檢測器檢測分離出的化合物，并根據檢測結果進行分析處理。
-使用餾分收集器收集目標化合物，根據時間編程或檢測器信號強度自動觸發(fā)收集。
-對收集到的餾分進行進一步分析和鑒定，如純度檢測、結構確認等。
